如何配製teknova培養基?有哪些步驟?
發布日期:2022-11-17 點擊:1849
pH值是培養基的常規監控項目,微生物的生長不僅依賴豐富的營養,還需要在適宜的pH值範圍內才能正常生長繁殖或體現其生物特性。因此,teknova培養基pH值是否符合要求直接影響微生物檢驗結果。
teknova培養基的配製:
配料—溶解—調PH—過濾—分裝—包紮—滅菌—擺斜麵—貯存
1、配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥後立即蓋上瓶蓋)。
2、溶解:澱粉溶解:少量冷水調成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
3、調PH:用1N的鹽酸溶液或1N的NaOH溶液把培養基調節到所要求的值。
4、過濾:濾紙或棉花進行過濾。(有時可以省去)
5、分裝:一般teknova培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
(1)三角瓶
若作靜置培養,則100mL培養基/250mL的三角瓶,不能超過150mL培養基/250mL的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易汙染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20mL培養基/250mL的三角瓶,保證通氣良好。
(2)試管分裝
液體培養基一般裝4-5mL,約試管的1/4高度;固體斜麵培養基一般裝3-4mL,約試管的1/5高度。
6、包紮:分裝好後,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。
7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。
8、擺斜麵:滅菌後需要擺斜麵的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜麵,約占試管長度的1/2。
9、貯存:teknova培養基在30℃下放置一天,無汙染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放於2-8℃冰箱中備用。